Caracterização do complexo Candida glabrata em isolados de hemocultura e avaliação da sensibilidade a antifúngicos

Resumo

 Candida glabrata assumiu grande importância na clínica médica, desde que, sua resistência  adquirida ao fluconazol foi descrita. Além disso, estudos mostraram a fraca atividade in vitro  de outros fármacos azólicos contra isolados dessa espécie. C. glabrata é agente de infecções  invasivas e o monitoramento da eficácia de antifúngicos usados na prática médica frente a isolados  dessa espécie tem relevância clínica. C. bracarensis e C. nivariensis são espécies relacionadas,  fenotipicamente, à C. glabrata para as quais há necessidade de métodos moleculares para sua  identificação. Na América Latina, a ocorrência de infecções em corrente sanguínea por C. glabrata  e espécies correlatas não é tão alta quanto na América do Norte e, por isso, pouco é conhecido  sobre sua distribuição e perfil de suscetibilidade a antifúngicos nessa região. Neste estudo, foram  analisados 75 isolados com características morfológicas e bioquímicas de C. glabrata, obtidos  da corrente sanguínea de pacientes atendidos em hospitais do estado de São Paulo, entre 2007 e  2013. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) de cinco fármacos antifúngicos: anfotericina  B, caspofungina, voriconazol, fluconazol e itraconazol, foram determinadas pela metodologia de  microdiluição de referência M27-A3 do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). A  ação fungicida de anfotericina B foi avaliada por método de curva de morte. A pesquisa das duas  espécies correlatas foi realizada com metodologia de reação em cadeia da polimerase (PCR) em  todos os isolados. Nenhum isolado de C. bracarensis e C. nivariensis foi encontrado neste estudo.  Resistência a itraconazol foi encontrada em 18,6 % (14) das cepas de C. glabrata. Altos valores de  CIM de voriconazol (> 0,5 mg/L), de acordo com cut-off (ponto de corte) epidemiológico, foram  observados para duas cepas. O intervalo de CIM para fluconazol variou de 4mg/L a 16mg/L, para  caspofungina os valores de CIM situaram-se entre 0,03 mg/L e 0,5 mg/L e os de anfotericina B  ficaram entre 0,12mg/L e 1 mg/L. Na curva de morte verificou-se que a maioria das cepas morreu  antes das 24h, permanecendo viáveis apenas 3 isolados, sendo que 2 deles não sofreram ação  fungicida da anfotericina B dentro das condições experimentais. Concluiu-se que fluconazol,  anfotericina B ecaspofungina mostraram forte efeito inibitório frente a todos os 75 isolados de C.  glabrata; no entanto, resistência ao itraconazol e menor sensibilidade ao voriconazol, assim como  tolerância à ação fungicida de anfotericina B foi observada. Esses dados indicaram emergência  de isolados resistentes a mais de um fármaco e reforçam a necessidade de monitorar a atividade  de antifúngicos usados na clínica médica, com vistas a otimizar o tratamento dos casos de  candidemia.