Palavras-chave
resistência a antibióticos
protease
lipase
Como Citar
Resumo
Bactérias psicrotróficas isoladas da parede, do fundo e da pá de homogeneização de tanques coletivos de resfriamento de leite, após o processo de higienização, foram identificadas e caracterizadas quanto à capacidade de produzir lipase, lecitinase e protease, bem como determinada a sensibilidade dos isolados a antibióticos. Foram coletadas amostras de 32 tanques coletivos, localizados em diferentes cidades no sul do estado de Minas Gerais, por meio de swab de amostra da superfície, e analisadas pelas técnicas de diluições seriadas com plaqueamento em ágar triptona de soja e incubação das placas a 7 ºC por 10 dias. As bactérias isoladas foram identificadas bioquimicamente pelos kits API 20NE (Biomérieux-Brasil) e Bactray I e II (Laborclin-Brasil). Foram identificados 197 isolados, os quais foram caracterizados quanto à produção de lipase, lecitinase e protease. Para efetuar o teste de resistência a antibióticos, 21 isolados foram selecionados. Contagens entre < 1 e 108 UFC/cm2 foram observadas, com prevalência de Serratia sp., Klebsiela sp. e espécies do gênero Pseudomonas sp. Os isolados identificados apresentaram elevada atividade proteolítica e lipolítica, e a atividade de lecitinase foi menos pronunciada. A multidroga resistência foi detectada em 54% dos isolados analisados.Referências
1. Costerton W, Lewamdowski Z, Caldwell DE, Korker DR, Lappin Scott HM. Microbial biofilms. Annu Rev Microbiol. 1995;49(1):711-45.
2. De Andrade NJ. Higiene na indústria de alimentos: avaliação e controle da adesão e formação de biofilmes bacterianos. São Paulo (SP): Varela; 2008.
3. Kumar CG, Anand SK. Significance of microbial biofilms in food industry: a review. Int J Food Microbiol. 1998;42(1-2):9-27.
4. Sutehrland IW. Biofilm exopolysaccharides: a strong and sticky framework. Microbiol. 2001;147(1):3-9.
5. Drenkard E. Antimicrobial resitance of Pseudomonas aeruginosa biofilms. Review. Microbes Infect. 2003;5(13):1213-9.
6. Burmølle M, Webb JS, Rao D, Hansen LH, Sørensen SJ, Kjelleberg S. Enhanced biofilm formation and increased resistance to antimicrobial agents and bacterial invasion are caused by synergistic interactions in multispecies biofilms. Appl Environ Microbiol. 2006;72 (6):3916-23.
7. Marques SC, Rezende JGOS, Alves LAF, Silva BC, Alves E, Abreu LR, et al. Formation of biofilms by Staphylococcus aureus on stainless steel and glass surfaces and its resistance to some selected chemical sanitizers. Braz. J. Microbiol. 2007;38(3):538-43.
8. Donlan RM, Costerton JW. Biofilms: Survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clin Microbiol Rev. 2002;15(2):167-93.
9. Prince AS. Biofilms, antimicrobial resistance, and airway infection. New Engl. J. Med. 2002:347(14):1110-1.
10. Douglas LJ. Candida biofilms and their role in infection. Trends Microbiol. 2003;11(1):30-6.
11. Stewart PS, Mukherjee PK, Ghannoum MA. Biofilm antimicrobial resistance. In: Ghannoum MA, O’Toole GA, editors. Microbial Biofilms. Washington (DC): American Society for Microbiology; 2004.
12. Bernbom N, Vogel BF, Gram L. Listeria monocytogenes survival of UV-C radiation is enhanced by presence of sodium chloride, organic food material and by bacterial biofilm formation. Int J Food Microbiol. 2011;147(1):69-73.
13. McNeill K, Hamilton IR. Acid tolerance response of biofilm cells of Streptococcus mutans. FEMS Microbiol Lett. 2003;221(1):25-30.
14. Caixeta DS, Scarpa TH, Brugnera DF, Freire DO, Alves E, Abreu LR, et al. Chemical sanitizers to control biofilms formed by two. Pseudomonas species on stainless steel surface. Ciên Tecnol Alim. 2012(1):142-50.
15. Boari CA, Alves MP, Tebaldi VMR, Savian TV, Piccoli RH. Formação de biofilme em aço inoxidável por Aeromonas hydrophila e Staphylococcu aureus usando leite e diferentes condições de cultivo. Ciên Tecnol Alim: 2009;29(4):886-95.
16. Herrera JJR, Cabo ML, González A, Pazos I, Pastoriza L. Adhesion and detachment kinectis of several strains of Staphylococcus aureus subsp. aureus under three different experimental conditions. Food Microbiol. 2007;24(6):585-91.
17. Hall-Stoodley L, Costerton JW, Stoodley P. Bacterial biofilms: from the natural environment to infectious diseases. Nat Rev Microbiol. 2004;(2):95-108.
18. Teale CJ. Antimicrobial resistance and the food chain. J Appl Microbiol. Symposium Suppl. 2002;92(1):85-9.
19. Salisbury JG, Nicholls TJ, Lammerding AM, Turnidge J, Nunn M. A risk analysis framework for the long-term management of antibiotic resistance in food-producing animals. Int J Antimicrob Agents. 2002;20(3):153-64.
20. Cantón R, Garbajosa-Ruiz P. Co-resistance: an opportunity for the bacteria and resistance genes. Curr Opin Pharmacol. 2011;(5):477-85.
21. Gould IM. The epidemiology of antibiotic resistance. Int J Antimicrob Agents. 2008;32 Supp 1:2-9.
22. Kallen AJ, Hidron AI, Patel J, Srinvasan A. Multridug resistance among gram-negative pathogens that caused healthcare-associated infections reported to the national healthcare safety network, 2006-2008. Infect Control Hosp Epidemiol. 2010;31(5):528-31.
23. Magiorakos AP, Srinivasan A, Carey RB, Carmeli Y, Falagas ME, Giske CG, et al. Multidrug-resistant, extensively drug-resistant and pandrug-resistant bacteria: an international expert proposal for interim standard definitions for acquired resistance. Clin Microbiol Infect. 2012;18(3):268-81.
24. Clinical and Laboratory Standards Institute (Pensilvânia – EUA) – CLSI. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. Twenty first informational suppl. M100-S21. 2011:30(1):1-142.
25. European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing – EUCAST. Breakpoint tables for interpretation of MICs and zone diameters. Version 2.0. 1º jan 2012.
26. Sorhaug T, Stepaniak L. Psychrotrophs and their enzymes in milk and dairy products: Quality aspects. Trends Food Sci Technol. 1997;8(2):35-41.
27. Braun P, Sutherland JP. Predictive modelling of growth and measurement of enzymatic synthesis and activity by a cocktail of selected Enterobacteriaceae and Aeromonas hydrophila. Int J Food Microbiol. 2005;105(2):257-66.
28. Law BA, Andrews AT, Sharpe ME. Gelation of UHT sterilized milk by proteases from a strain of Pseudomonas fluorescens, isolated from raw milk. J. Dairy Res. 1977;44:145-8.
29. Garrity GM, Holt JG. The road map to the Manual. In: Boone DR, Castenholz RW. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. New York, Berlin: Springer-Verlag; 2001. p. 119-66.
30. Frank JF, Christen GL, Bullerman LB. Tests for groups of microorganisms. In: Marshall RT. Standard methods for the examination of dairy products. Washington: American Public Health Association; 2005. p. 271-86.
31. Bauer AW, Kirby WMM, Sherris JC, Turck M. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am. J. Clin Pathol. 1996;45(4):493-6.
32. Sveum WH, Moberg LJ, Rude RA, Frank JF. Microbiological monitoring of the food processing environment. In: Vanderzant C, Splittstoesser DF. Compendium of methods for the microbiological examination of foods. Washington (DC): APHA; 1992. p. 51-74.
33. Carvalho AF, Silva ID, Careli RT, Morell NA, Andrade NJ. Adesão de Pseudomonas spp em tanques de estocagem de leite cru refrigerado granelizado na microrregião de Viçosa/MG. In: Congresso Brasileiro de qualidade do leite. Goiânia, 2006.
34. Adams DM, Barach IT, Spec ML. Heat resistant proteases produced in milk by psychrotrophic bacteria of dairy origin. J Dairy Sci. 1975;58 (6):828-35.
35. Eneroth A, Christiansson A, Brendehaug J, Molin G. Critical contamination sites in the production line of pasteurised milk, with reference to the psychtrophic spoilage flora. Int Dairy J. 1998;8(9):829-34.
36. Moraes APR, Badini PV, Souza MMS, Bittencour AJ. Avaliação da capacidade de Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) em carrear bactérias envolvidas nas etiologias das mastites de municípios do Rio de Janeiro. Rev Bras Parasitol Vet. 2004;13(4):143-9.
37. El-Sukhon SN. Identification and characterization of Klebsiella isolated from milk and milk products. Food Microbiol. 2003;20(2):225-30.
38. Santana EHW, Beloti V, Barros MAF, Moraes LB, Gusmão VVT, Pereira MS. Contaminação do leite em diferentes pontos do processo de produção: I Microrganismos aeróbios mesófilos e psicrotróficos. Semina: Ciências Agrárias. 2001;22(2):145-54.
39. Dogan B, Boor KJ. Genetic diversity and spoilage potentials among Pseudomonas spp. isolated from fluid milk products and dairy processing plants. Appl Environ Microbiol. 2003;69(1):130-8.
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Copyright (c) 2012 Simone Cristina Marques, Suzana Reis Evangelista, Roberta Hilsdorf Piccoli