Avaliação da técnica de reação de polimerase em cadeia (PCR) para identificação de Mycobacterium bovis em microcolônias isoladas em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 modificado
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Palavras-chave

tuberculose
Mycobacterium bovis
técnicas e procedimentos diagnósticos
PCR
diagnóstico precoce

Como Citar

1.
Rosário TR do, Dib CC, Roxo E, Pinheiro SR, Vasconcellos SA, Benites NR. Avaliação da técnica de reação de polimerase em cadeia (PCR) para identificação de Mycobacterium bovis em microcolônias isoladas em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 modificado. Rev Inst Adolfo Lutz [Internet]. 1º de dezembro de 2012 [citado 4º de dezembro de 2024];71(4):753-6. Disponível em: https://periodicos.saude.sp.gov.br/RIAL/article/view/32495

Resumo

A associação da técnica de cultivo em camada delgada no meio de ágar Middlebrook 7H11 modificado com a Reação de Polimerase em Cadeia (PCR) possibilitou a identificação precoce de Mycobacterium bovis em colônias macroscópicas entre o 12º e o 25º dia de crescimento. Com o objetivo de diminuir o tempo necessário para efetuar a identificação de Mycobacterium bovis, avaliou-se o uso combinado dessas duas técnicas, em microcolônias de micobactérias, no oitavo dia pós-semeadura. Até o último dia de observação, todas as amostras com positividade no ensaio da PCR já apresentavam crescimento microscópico, possibilitando-se a realização de diagnóstico precoce da tuberculose bovina mesmo sem aparente crescimento macroscópico das colônias.
https://doi.org/10.53393/rial.2012.71.32495
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Referências

1. Bermudez HR, Renteria ET, Medina BG, Hori-Oshima S, De La Mora VAV, Lopez VG, et al. Correlation between histopathological, bacteriological and PCR diagnosis of bovine tuberculosis. J Anim Vet Advances. 2010;9:2082-8.

2. Hosek J, Svastova P, Moravkova M, Pavlik I, Bartos M. Methods of mycobacterial DNA isolation from different biological material: a review. Vet Med-Czech. 2006;51:180-92.

3. OIE. Bovine tuberculosis. In: OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 2009. Chapter 2.4.7. 16p. Available from: [http://www.oie.int/en/international-standard-settin/terrestrial-manual/access-online].

4. Stewart LD, McNair J, McCallan L, Thompson S, Kulakov LA, Grant IR. Production and evaluation of antibodies and phage display-derived peptide ligands for immunomagnetic separation of Mycobacterium bovis. J Clin Microbiol. 2012;50:1598-605.

5. Marcondes AG, Shikama MLM, Vasconcellos SA, Benites NR, Morais ZM, Roxo E, et al. Comparação entre a técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7 H11 e meio de Stonebrink para isolamento de Mycobacterium bovis em amostras de campo. Braz J Vet Res Ani Sci. 2006;43:362-9.

6. Stewart LD, McNair J, McCallan L, Gordon A, Grant IR. Improved detection of Mycobacterium bovis infection in bovine lymph node tissue using immunomagnetic separation (IMS) – based methods. Plos One. 2013;8:e58374.

7. Collins DM, Radford AJ, de Lisle GW, Billman-Jacobe H. Diagnosis and epidemiology of bovine tuberculosis using molecular biological approaches. Vet Microbiol. 1994;40:83-94.

8. Roxo E, Ikuno AA, Ferreira VCA, Harakava R, Ruggiero APM, Vialta A. Avaliação de diferentes protocolos de extração de DNA de Mycobacterium bovis a partir de leite. Arq Inst Biol. 2002;69 Supl:46.

9. Universidad de las Naciones Unidas. Nuevas tecnologias para el diagnóstico y pruebas de susceptibilidad a drogas de M. tuberculosis para países en vias de desarollo. In: Programa de Biotecnologia para Latinoamérica y el Caribe – BIOLAC. Red Latinoamericana y del Caribe de tuberculosis – RELACTB. La Paz (Bolivia); 1998:18-21.

10. De Kantor IN. Organización Panamericana de la Salud. Centro Panamericano de Zoonosis. Bacteriología de la tuberculosis humana y animal. Série de Monografias Científicas y Técnicas. 1998;11(1):63.

11. Bemer-Melchior P, Drugeon HB. Inactivation of Mycobacterium tuberculosis for DNA Typing Analysis. J Clin Microbiol. 1999;37:2350-1.

12. Rodriguez JG, Mejia GI, del Portillo P, Patarroyo ME, Murillo LA. Species-specific identification of Mycobacterium bovis by PCR. Microbiology. 1995;141:2131-8.

13. Beige J, Lokies J, Schaberg T, Finckh U, Fischer M, Mauch H, et al. Clinical evaluation of a Mycobacterium tuberculosis PCR assay. J Clin Microbiol. 1995;33:90-5.

14. Dib CC, Morais ZM, Souza GO, Amaku M, Benites NR, Pinheiro SR. Utilização de uma técnica rápida para o diagnóstico de Mycobacterium bovis em amostras de leite experimentalmente inoculadas. Arq Inst Biol. 2006;73:149-55.

15. Trabulsi LR, Alterthum F. Microbiologia. 5.ed. São Paulo: Atheneu; 2008.

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Copyright (c) 2012 Tatiana Reis do Rosário, Cristina Corsi Dib, Eliana Roxo, Sônia Regina Pinheiro, Silvio Arruda Vasconcellos, Nilson Roberti Benites

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