Palabras clave
Mycobacterium bovis
técnicas e procedimentos diagnósticos
PCR
diagnóstico precoce
Cómo citar
Resumen
A associação da técnica de cultivo em camada delgada no meio de ágar Middlebrook 7H11 modificado com a Reação de Polimerase em Cadeia (PCR) possibilitou a identificação precoce de Mycobacterium bovis em colônias macroscópicas entre o 12º e o 25º dia de crescimento. Com o objetivo de diminuir o tempo necessário para efetuar a identificação de Mycobacterium bovis, avaliou-se o uso combinado dessas duas técnicas, em microcolônias de micobactérias, no oitavo dia pós-semeadura. Até o último dia de observação, todas as amostras com positividade no ensaio da PCR já apresentavam crescimento microscópico, possibilitando-se a realização de diagnóstico precoce da tuberculose bovina mesmo sem aparente crescimento macroscópico das colônias.Citas
1. Bermudez HR, Renteria ET, Medina BG, Hori-Oshima S, De La Mora VAV, Lopez VG, et al. Correlation between histopathological, bacteriological and PCR diagnosis of bovine tuberculosis. J Anim Vet Advances. 2010;9:2082-8.
2. Hosek J, Svastova P, Moravkova M, Pavlik I, Bartos M. Methods of mycobacterial DNA isolation from different biological material: a review. Vet Med-Czech. 2006;51:180-92.
3. OIE. Bovine tuberculosis. In: OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 2009. Chapter 2.4.7. 16p. Available from: [http://www.oie.int/en/international-standard-settin/terrestrial-manual/access-online].
4. Stewart LD, McNair J, McCallan L, Thompson S, Kulakov LA, Grant IR. Production and evaluation of antibodies and phage display-derived peptide ligands for immunomagnetic separation of Mycobacterium bovis. J Clin Microbiol. 2012;50:1598-605.
5. Marcondes AG, Shikama MLM, Vasconcellos SA, Benites NR, Morais ZM, Roxo E, et al. Comparação entre a técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7 H11 e meio de Stonebrink para isolamento de Mycobacterium bovis em amostras de campo. Braz J Vet Res Ani Sci. 2006;43:362-9.
6. Stewart LD, McNair J, McCallan L, Gordon A, Grant IR. Improved detection of Mycobacterium bovis infection in bovine lymph node tissue using immunomagnetic separation (IMS) – based methods. Plos One. 2013;8:e58374.
7. Collins DM, Radford AJ, de Lisle GW, Billman-Jacobe H. Diagnosis and epidemiology of bovine tuberculosis using molecular biological approaches. Vet Microbiol. 1994;40:83-94.
8. Roxo E, Ikuno AA, Ferreira VCA, Harakava R, Ruggiero APM, Vialta A. Avaliação de diferentes protocolos de extração de DNA de Mycobacterium bovis a partir de leite. Arq Inst Biol. 2002;69 Supl:46.
9. Universidad de las Naciones Unidas. Nuevas tecnologias para el diagnóstico y pruebas de susceptibilidad a drogas de M. tuberculosis para países en vias de desarollo. In: Programa de Biotecnologia para Latinoamérica y el Caribe – BIOLAC. Red Latinoamericana y del Caribe de tuberculosis – RELACTB. La Paz (Bolivia); 1998:18-21.
10. De Kantor IN. Organización Panamericana de la Salud. Centro Panamericano de Zoonosis. Bacteriología de la tuberculosis humana y animal. Série de Monografias Científicas y Técnicas. 1998;11(1):63.
11. Bemer-Melchior P, Drugeon HB. Inactivation of Mycobacterium tuberculosis for DNA Typing Analysis. J Clin Microbiol. 1999;37:2350-1.
12. Rodriguez JG, Mejia GI, del Portillo P, Patarroyo ME, Murillo LA. Species-specific identification of Mycobacterium bovis by PCR. Microbiology. 1995;141:2131-8.
13. Beige J, Lokies J, Schaberg T, Finckh U, Fischer M, Mauch H, et al. Clinical evaluation of a Mycobacterium tuberculosis PCR assay. J Clin Microbiol. 1995;33:90-5.
14. Dib CC, Morais ZM, Souza GO, Amaku M, Benites NR, Pinheiro SR. Utilização de uma técnica rápida para o diagnóstico de Mycobacterium bovis em amostras de leite experimentalmente inoculadas. Arq Inst Biol. 2006;73:149-55.
15. Trabulsi LR, Alterthum F. Microbiologia. 5.ed. São Paulo: Atheneu; 2008.
Esta obra está bajo una licencia internacional Creative Commons Atribución 4.0.
Derechos de autor 2012 Revista del Instituto Adolfo Lutz