Resumo
Pela legislação brasileira o leite em pó não pode conter sólidos de soro de leite. As autoridades competentes enfrentam dificuldades no controle desse tipo de fraude, apesar de diversos métodos terem sido estudados e propostos para detectar a adulteração. Neste estudo foi realizada a caracterização do leite em pó, utilizando-se a técnica de eletroforese adaptada, para determinar adulteração em amostras de leite em pó contendo diferentes concentrações de soro (2%, 4%, 6%, 8% e 10%) e pelos perfis protéicos. Foi empregada a técnica de SDS-PAGE com modificações nos procedimentos de conservação dos géis após preparo, tempo entre preparo e aplicação, voltagem e corrente na fonte eletroforética, tempos de revelação e secagem, obtendo-se géis com resultados satisfatórios quando analisados por meio de software Image Quant TL. A técnica de SDS-PAGE adaptada foi eficiente para avaliar as características das amostras de leite em pó e de soro em pó separadamente. Houve possibilidade de identificar a adição de soro de leite, porém sem discernimento da correlação entre o nível de adição e a quantidade de soro adicionada. A SDS-PAGE modificada mostrou bom desempenho na caracterização de proteínas de leite em pó, de soro de leite em pó e de suas misturas.
Referências
1. Magalhães MA. Determinação de fraude de leite com soro de leite pela análise de CMP e pseudo-CMP por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa com detecção por espectrometria de massa. [dissertação de mestrado]. Viçosa (MG): Universidade Federal de Viçosa; 2008.
2. Serpa L. Concentração de proteínas de soro de queijo por evaporação a vácuo e ultrafiltração [dissertação de mestrado]. Erechim (RS): Universidade Regional Integrada; 2005.
3. Brasil. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa n° 69, de 13 de dezembro de 2006. Institui o critério de avaliação da qualidade do leite in natura, concentrado e em pó, reconstituídos, com base no método analítico oficial físico-quimico denominado “Índice CMP”, de que trata a IN 68 de 12 de dezembro de 2006. Diário Oficial da União. Brasília, DF, 14 de dez 2006. Seção 1, n° 239. p. 8.
4. De Souza EMT, Arruda SF, Brandão PO, Siqueira EMA. Electrophoretic analisys to detect and quantify additional whey in milk and dairy beverages. Ciênc Tecnol Aliment. 2000; 20(3): 314-7.
5. Carvalho BMAC, Lorendane M, Pereira Alcântra LA, Ferreira Bonomo RC. Métodos de detecção de fraude em leite por adição de soro de queijo. [acesso em 2011 Abr 18]. Disponível em: [http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n060607/060704.pdf ].
6. Furtado MAM. Desenvolvimento de um novo método analítico para a determinação de soro adicionado ao leite pasteurizado [dissertação de mestrado]. Lavras (MG): Universidade Federal de Lavras; 1989.
7. Wolfschoon-Pombo AF, Furtado MAM. Detection of adulteration of pasteurised milk with whey by determination of the casein-bound phosphorus and protein nitrogen content. Z. Lebensm-Unters.-Forsch., A Food Res Technol. 1989; 188: 16-21.
8. Pereira DBC, Silva PHF, Júnior LCGC, Oliveira LL. Físico-Química do leite e derivados – Métodos Analíticos. Juiz de Fora (MG): Templo Gráfica e Editora Ltda; 2001.
9. Buraglia, BM. Detección de caseinato y suero em leche y productos lácteos mediante técnicas electroforéticas, cromatográficas y espectroscópicas [tese de doutorado]. Madrid: Universidad Complutense de Madrid; 2001.
10. Spreer, E. Lactologia industrial: leche, preparación y elaboración, maquinas, instalaciones e aparatos, productos lácteos. 2.ed: Zaragoza: Acribia; 1991
11. Spreer, E. Lactologia industrial. Zaragoza: Acriba; 1973.
12. Antunes, AJ. Funcionalidade de proteínas de soro de leite. Barueri (SP): Editora Manole; 2003. 13.
13. Mollé D, Léonil J. Heterogeneity of the bovine K-casein caseinomacropeptide, resolved by liquid chromatography on-line with electrospray ionization mass spectrometry. J Chromatogr A. 1995; 708(2):223-30.
14. Van Riel J, Olieman C. Determination of caseinomacropeptide with capillary zone electrophoresis and its application to the detection and estimation of rennet whey solids in milk and buttermilk powder. Electrophoresis. 1995; 16(4):529–33.
15. Olieman C, Van Riel JAM. Detection of rennet whey solids in skin milk and buttermilk powder with reversed-phase HPLC. Neth. Milk Dairy J. 1989; 43: 171-89.
16. Alvin TC. Efeito da qualidade do leite na detecção do soro lácteo por cromatografia líquida de alto desempenho filtração gélica (GF-HPLC) [dissertação de mestrado]. Viçosa (MG): Universidade Federal de Viçosa; 1992.
17. Recio I, Garcia-risco MR, Ramos M, Lòpez-fandino R. Characterization of peptides produced by the action of psychrotrophic proteinases on Kappa-casein. J Dairy Res. 2000; 67(4):625-30.
18. Recio, I, Frutos M, Olano, A.; Ramos, M. Protein changes in stored ultra-high-temperature-treated milks studied by capillary electrophoresis and high-performance liquid chromatography. J Agric Food Chem 1996, 44(12):3955-9.
19. Brasil. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Portaria no 369, de 4 de setembro de 1997. Aprova o Regulamento Técnico de Identidade e Qualidade de Leite em Pó. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil. Brasília, DF, 08 set. 1997. Seção 1, n° 172. p. 19699.
20. Vilela SC. Deteccion de suero de queseria agregado a leche pasteurizada y leche em polvo. Determinación del glicomacropeptido por electroforesis. [dissertação de mestrado]. Valdivia: Universidad Austral de Chile; 1987.
21. Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970; 227(5259):680-5.
22. Alfenas AC, Peters-Robinson I, Brune W. Eletroforese de proteínas e isoenzimas de fungos e essências florestais. Viçosa (MG): Universidade Federal de Viçosa, 1991.
23. Silva Jr JG. Eletroforese de proteínas. Rio de Janeiro: Editora Interciência; 2001.
24. Basch JJ, Junior FWD, Procino LG, Holsinger VH, Junior HMF. Quantitation of caseins and whey proteins of processed milks and whey protein concentrates, application of gel electrophoresis, and comparison with Harland-Ashworth procedure. J Dairy Sci. 1985; 68(1):23-31.
25. Farrel HMJr, Jimenez-Flores R, Bleck GT, Brown EM, Butler JE, Creamer LK, et al. Nomenclature of the proteins of cow ́s milk – Sixth Revision. J Dairy Sci. 2004; 87(6):1641-74.
26. Dzurec DJ, Zall RR. Effect of heating, cooling, and storing milk on casein and whey proteins. J Dairy Sci. 1985; 68(2): 273-80.
27. Law, AJR, Leaver, J. Effect of pH on the thermal desnaturation of whey proteins in milk. J Agric Food Chem. 2000; 48: 672-9.
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