Detecção de antígenos em cortes parafinados de vermes e caramujos infectados por Angiostrongylus cantonensis pela reação de imunofluorescência

Autores

  • Felipe Correa Rezende de Souza Núcleo de Enteroparasitas, Centro de Parasitologia e Micologia do Instituto Adolfo Lutz https://orcid.org/0000-0003-0028-6566
  • Leyva Cecília Vieira de Melo Núcleo de Enteroparasitas, Centro de Parasitologia e Micologia do Instituto Adolfo Lutz https://orcid.org/0000-0002-2014-8614
  • Cristina Kanamura Núcleo de Anatomia Patológica, Centro de Patologia, Instituto Adolfo Lutz https://orcid.org/0000-0003-2537-2356
  • Dan Jessé Gonçalves da Mota Secretaria Municipal da Saúde de São Paulo - (UVIS Parelheiros), Departamento de Vigilância Sanitária, Prefeitura do Município de São Paulo https://orcid.org/0000-0001-6393-2663
  • Silvia Gabriel Chiodelli Gabriel Chiodelli Núcleo de Enteroparasitas, Centro de Parasitologia e Micologia do Instituto Adolfo Lutz https://orcid.org/0000-0002-1261-3459
  • Pedro Luiz Silva Pinto Núcleo de Enteroparasitas, Centro de Parasitologia e Micologia do Instituto Adolfo Lutz https://orcid.org/0000-0002-3727-596X

DOI:

https://doi.org/10.53393/rial.2022.v81.36756

Palavras-chave:

Angiostrongylus cantonensis, Angiostrogilíase, Antígenos de Helmintos, Técnicas Histológicas, Imunofluorescência Indireta

Resumo

A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) foi utilizada para localizar antígenos em estruturas estágio-específicas em cortes parafinados de vermes fêmeas e em tecidos de caramujos do Gênero Biomphalaria infectados com larvas de terceiro estágio de Angiostrongylus cantonensis. Soros de casos confirmados de meningite eosinfílica foram usados para avaliação da reatividade. Soros não reagentes de casos suspeitos; de pacientes com outras parasitoses e de indivíduos sem outras etiologias foram utilizados como controle de reatividade cruzada. Anticorpos da classe IgG foram reativos para antígenos presentes nos dois estágios e, anticorpos IgM somente para o estágio larvário. Nos cortes de vermes, as marcações fluorescentes foram assinaladas nas cutículas e estruturas internas, com acentuada marcação para os conteúdos uterinos. Nos tecidos dos caramujos as larvas foram encontradas exclusivamente no interior dos granulomas, com marcações fluorescentes nas  cutículas das larvas e no interior dos tecidos granulomatosos. O padrão de fluorescência no granuloma sugere a marcação de antígenos excretores/secretores. Reatividade cruzada mais expressiva ocorreu com anticorpos presentes em soros de pacientes com outras parasitoses, com destaque para estrongiloidíase. A RIFI em cortes parafinados abre novas perspectivas para identificação de antígenos e de marcadores sorológicos, que possam ser aplicados no aprimoramento do diagnóstico laboratorial da meningite eosinofílica.

Referências

1. Wang QP, Lai DH, Zhu XQ, Chen XG, Lun ZR. Human angiostrongyliasis. Lancet Infect Dis. 2008;8(10):621-30. https//:doi.org/10.1016/S1473-3099(08)70229-9

2. Graeff-Teixeira C, Morassutti AL, Jones MK. Diagnosing and understanding angiostrongyliasis, a zoonotic cause of meningitis. ACS Chem Neurosci. 2018;21;9(3):393-4. https//:doi.org/10.1021/acschemneuro.8b00018

3. Kramer K J, Posner J, Gosnell W L. Role of gastropod mucus in the transmission of Angiostrongylus cantonensis, a potentially serious neurological infection. ACS Chem Neurosci. 2018;9(4):629-32. https://doi.org/10.1021/acschemneuro.7b00491

4. Graeff-Teixeira C, da Silva AC, Yoshimura K. Update on eosinophilic meningoencephalitis and its clinical relevance. Clin Microbiol Rev. 2009;22(2):322-48, Table of Contents. https://doi.org/10.1128/CMR.00044-08

5. Feng Y, Zheng C, Zhou Z, Xiong H, Feng F, Xie F et al. IL-17A neutralizing antibody attenuates eosinophilic meningitis caused by Angiostrongylus cantonensis by involving IL-17RA/Traf6/NF-κB signaling. Exp Cell Res. 2019;384(1):111554. https://doi.org/10.1016/j.yexcr.2019.111554

6. Lv S, Zhou XN, Andrews JR. Eosinophilic meningitis caused by Angiostrongylus cantonensis. ACS Chem Neurosci. 2017;8(9):1815-6. https://doi.org/10.1021/acschemneuro.7b00233

7. Morassutti AL, Thiengo SC, Fernandez M, Sawanyawisuth K, Graeff-Teixeira C. Eosinophilic meningitis caused by Angiostrongylus cantonensis: an emergent disease in Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2014;109(4):399-407. https://doi.org/10.1590/0074-0276140023

8. Espírito-Santo MC, Pinto PL, Mota DJ, Gryschek RC. The first case of Angiostrongylus cantonensis eosinophilic meningitis diagnosed in the city of São Paulo, Brazil. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 2013;55(2):129-32. https://doi.org/10.1590/s0036-46652013000200012

9. Barbosa TA, Thiengo SC, Fernandez MA, Graeff-Teixeira C, Morassutti AL, Mourão FRP et al. Infection by Angiostrongylus cantonensis in both humans and the snail Achatina (Lissachatina) fulica in the city of Macapá, in the Amazon Region of Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2020;115:e200115. https://doi.org/10.1590/0074-02760200115

10. da Mota DJG, de Melo LCV, Pereira-Chioccola VL, Gava R, Pinto PLS. First record of natural infection by Angiostrongylus cantonensis (Nematoda: Metastrongyloidea) in Belocaulus willibaldoi and Rattus norvegicus in an urban area of São Paulo city, SP, Brazil. Heliyon. 2020;6(10):e05150. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2020.e05150

11. Souza FN, Aguiar Santos M, Almeida Alves D, Cecília Vieira de Melo L, Jessé Gonçalves da Mota D, Cristina Pertile A et al. Angiostrongylus cantonensis in urban populations of terrestrial gastropods and rats in an impoverished region of Brazil. Parasitology. 2021;148(8):948-1002. https://doi.org/10.1017/S0031182021000597

12. Wang QP, Wu ZD, Wei J, Owen RL, Lun ZR. Human Angiostrongylus cantonensis: an update. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2012;31(4):389-95. https://doi.org/10.1007/s10096-011-1328-5

13. Morassutti AL, Levert K, Perelygin A, da Silva AJ, Wilkins P, Graeff-Teixeira C. The 31-kDa antigen of Angiostrongylus cantonensis comprises distinct antigenic glycoproteins. Vector Borne Zoonotic Dis. 2012;12(11):961-8. https://doi.org/10.1089/vbz.2011.0957

14. Song Z, Huang H, Tan F, Zhang E, Hu J, Pan C. Differential proteomics analysis of female and male adults of Angiostrongylus cantonensis. Exp Parasitol. 2012;131(2):169-74. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2012.03.019

15. Chen KY, Lu PJ, Cheng CJ, Jhan KY, Yeh SC, Wang LC. Proteomic analysis of excretory-secretory products from young adults of Angiostrongylus cantonensis. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2019;114:e180556. https://doi.org/10.1590/0074-02760180556

16. Eamsobhana P, Yong HS. Immunological diagnosis of human angiostrongyliasis due to Angiostrongylus cantonensis (Nematoda: Angiostrongylidae). Int J Infect Dis. 2009;13(4):425-31. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2008.09.021

17. Morassutti AL, Rascoe LN, Handali S, DA Silva AJ, Wilkins PP, Graeff-Teixeira C. Cross-reactivity of the 31 kDa antigen of Angiostrongylus cantonensis – Dealing with the immunodiagnosis of meningoencephalitis. Parasitology. 2017;144(4):459-63. https://doi.org/10.1017/S0031182016001918

18. Rugai E, Mattos T, Brisola AP. Nova técnica para isolar larvas de nematóides das fezes - Modificação do Método de Baermann. Rev Inst Adolfo Lutz. 1954;14(1):5-8. [cited 2021 Jun 17]. Avaiable from: https://periodicos.saude.sp.gov.br/index.php/RIAL/article/view/33246

19. Deelder AM, Kornelis D. A comparison of the IFA and the ELISA for the demonstration of antibodies against schistosome gut-associated polysaccharide antigens in schistosomiasis. Z Parasitenkd. 1980;64(1):65-75. https://doi.org/10.1007/BF00927057

20. Michalany J. Técnica Histológica em Anatomia Patológica: com instruções para o cirurgião, enfermeira e citotécnico. 3.ed. São Paulo: Editora Michalany; 1998.296p.

21. Pan, CT. The general histology and topographic microanatomy of Australorbis glabratus. Bull. Mus. Comp. Zool. 1958; 119(3):237-59. [cited 2021 Jun 28]. Avaiable from: https://ia800204.us.archive.org/4/items/biostor-854/biostor-854.pdf

22. Kanamura HY, Silva RM, Chiodelli SG, Glasser CM, Dias LC. IgM-immunofluorescence test as a diagnostic tool for epidemiologic studies of Schistosomiasis in low endemic areas. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2002;97(4):485-9. https://doi.org/10.1590/s0074-02762002000400005

23. Voller A, De Savigny D. Diagnostic serology of tropical parasitic diseases. J Immunol Methods. 1981;46(1):1-29. https://doi.org/10.1016/0022-1759(81)90328-8

24. Nash TE. Antibody response to a polysaccharide antigen present in the schistosome gut. I. Sensitivity and specificity. Am J Trop Med Hyg. 1978;27(5):939-43. https://doi.org/10.4269/ajtmh.1978.27.939

25. Deelder AM, van Zeyl RJ, Fillié YE, Rotmans JP, Duchenne W. Recognition of gut-associated antigens by immunoglobulin M in the indirect fluorescent antibody test for schistosomiasis mansoni. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1989;83(3):364-7. https://doi.org/10.1016/0035-9203(89)90506-3

26. Andrade ZA, Sadigursky M. Estudos sobre um antígeno polissacáride do Schistosoma mansoni. Mem Inst Oswaldo Cruz. 1980;75(1-2):47-56. https://doi.org/10.1590/s0074-02761980000100005

27. Bender AL, Maurer RL, da Silva MC, Ben R, Terraciano PB, da Silva AC et al. Ovos e órgãos reprodutores de fêmeas de Angiostrongylus costaricensis são reconhecidos mais intensamente por soros humanos de fase aguda na angiostrongilíase abdominal. Rev Soc Bras Med Trop. 2003;36(4):449-54. https://doi.org/10.1590/s0037-86822003000400003

28. Harris KR, Cheng TC. The encapsulation process in Biomphalaria glabrata experimentally infected with the metastrongylid Angiostrongylus cantonensis: light microscopy. Int J Parasitol. 1975;5(5):521-8. https://doi.org/10.1016/0020-7519(75)90044-2

29. Dzik JM. Molecules released by helminth parasites involved in host colonization. Acta Biochim Pol. 2006;53(1):33-64.

30. Oku Y, Kamiya M. Circumoval and circumlarval precipitate reactions of Angiostrongylus cantonensis. Jpn J Vet Res. 1984;32(1):23-39.

31. Chen MX, Zhang RL, Chen JX, Chen SH, Li XH, Gao ST et al. Monoclonal antibodies against excretory/secretory antigens of Angiostrongylus cantonensis. Hybridoma (Larchmt). 2010;29(5):447-52. https://doi.org/10.1089/hyb.2010.0008

32. Shih HH, Chen SN. Immunodiagnosis of angiostrongyliasiswith monoclonal antibodies recognizing a circulating antigen of mol. wt 91,000 from Angiostrongylus cantonensis. Int J Parasitol. 1991;21:171-7. https://doi.org/10.1016/0020-7519(91)90007-T

33. Lai SC, Jiang ST, Chen KM, Lee HH. Matrix metalloproteinases activity demonstrated in the infective stage of the nematodes, Angiostrongylus cantonensis. Parasitol Res. 2005;97(6):466-71. https://doi.org/10.1007/s00436-005-1484-6

34. Lee JD, Yen CM. Protease secreted by the infective larvae of Angiostrongylus cantonensis and its role in the penetration of mouse intestine. Am J Trop Med Hyg. 2005;72(6):831-6.

35. Morassutti AL, Levert K, Pinto PM, da Silva AJ, Wilkins P, Graeff-Teixeira C. Characterization of Angiostrongylus cantonensis excretory-secretory proteins as potential diagnostic targets. Exp Parasitol. 2012;130(1):26-31. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2011.10.003

36. Rudd PM, Elliott T, Cresswell P, Wilson IA, Dwek RA. Glycosylation and the immune system. Science. 2001;23;291(5512):2370-6. https://doi.org/10.1126/science.291.5512.2370

37. Veríssimo CM, Morassutti AL, von Itzstein M, Sutov G, Hartley-Tassell L, McAtamney S et al. Characterization of the N-glycans of female Angiostrongylus cantonensis worms. Exp Parasitol. 2016;166:137-43. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2016.04.012

38. Morassutti AL, Levert K, Perelygin A, da Silva AJ, Wilkins P, Graeff-Teixeira C. The 31-kDa antigen of Angiostrongylus cantonensis comprises distinct antigenic glycoproteins. Vector Borne Zoonotic Dis. 2012;12(11):961-8. https://doi.org/10.1089/vbz.2011.0957

Arquivos adicionais

Publicado

2022-06-30

Como Citar

Souza, F. . C. R. de, Melo , L. C. V. de ., Kanamura , C. ., Mota , D. J. G. da, Chiodelli , S. G. C. G., & Silva Pinto, P. L. (2022). Detecção de antígenos em cortes parafinados de vermes e caramujos infectados por Angiostrongylus cantonensis pela reação de imunofluorescência . Revista Do Instituto Adolfo Lutz, 81, 1–15,e36756. https://doi.org/10.53393/rial.2022.v81.36756

Edição

Seção

ARTIGO ORIGINAL