Efeito sinérgico da combinação de compostos fenólicos e tobramicina na inibição de biofilmes de Pseudomonas aeruginosa

Abstract

A patogenicidade bacteriana envolve a expressão de componentes e estruturas celulares, como os biofilmes. Um dos mecanismos envolvidos na formação de biofilmes é a comunicação por quorum sensing (QS), que desempenha um papel fundamental na virulência de Pseudomonas aeruginosa. A preocupação com a resistência bacteriana demanda o desenvolvimento de novas estratégias antivirulência, que não dependam inteiramento dos antibióticos. Estudos recentes demonstram que compostos naturais, especialmente os fenólicos, inibem a formação de biofilmes e outros fenótipos regulados por QS. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito combinado de compostos fenólicos com o antibiótico tobramicina, em concentrações que não interferem no crescimento microbiano, na inibição de biofilmes de P. aeruginosa PAO1. A interação entre os compostos foi avaliada pelo método Checkerboard em microplacas de 96 poços contendo meio de cultura Luria Bertani (LB), tobramicina (0,53 a 4,28 μM), curcumina (6 a 50 μM), resveratrol, ácido rosmarínico, baicaleína (60 a 500 μM) e P. aeruginosa (1×10⁶ UFC/mL). Avaliou-se a formação dos biofilmes utilizando cristal violeta e os dados foram analisados no software SynergyFinder 3.0 para identificar combinações sinérgicas. Posteriormente, os biofilmes foram analisados em microscópio óptico e microscópio confocal de varredura a laser. As imagens revelaram a formação de um biofilme denso, compacto e com matriz fechada por P. aeruginosa PAO1. Na presençaapenas do antibiótico, observouse uma inibição parcial. Os melhores resultados foram observados nos tratamentos combinados, com células dispersas e distantes, evidenciando o sinergismo entre os fenólicos e o antibiótico. A combinação dos quatro compostos fenólicos apresentou uma inibição dose dependente, visto que a maior concentração (500 µM) inibiu completamente a formação do biofilme. Estes resultados ampliam o potencial biotecnológico dos compostos fenólicos visando futuras aplicações nas áreas médicas, farmacêuticas e alimentícias, propiciando novos estudos e desenvolvimento de novas estratégias antivirulência.