Identificação molecular e perfil de suscetibilidade de isolados clínicos de Aspergillus spp.: estudo multicêntrico

Abstract

Os avanços dos métodos de identificação têm permitido descrever novas espécies de fungos patogênicos. O sequenciamento genético se mostra uma ferramenta precisa para identificar micro organismos. Fungos filamentosos patogênicos têm o potencial de apresentar resistência aos antifúngicos que precisam ser descritas e estudadas. O presente trabalho tem como objetivo identificar as espécies de fungos filamentosos de diferentes isolados de diversas coleções brasileiras; definir o perfil de suscetibilidade aos antifúngicos de Aspergillus spp. Cento e trinta isolados das coleções de fungos pertencentes à Divisão do Laboratório Central do HC-FMUSP, Laboratório de Micologia Médica do Instituto de Medicina Tropical FMUSP, Laboratório Especial de Micologia da UNIFESP e Hospital Israelita Albert Einstein, foram identificados por sequenciamento de ITS rDNA, β-tubulina e avaliados os perfis de sensibilidade aos azólicos (itraconazol, voriconazol, posaconazol e isavuconazol) e anfotericina B por microdiluição em caldo, conforme o documento M38-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute. Os agentes são provenientes de culturas do trato respiratório (lavado broncoalveolar, escarro, secreção traqueal). Os 130 isolados quando expostos aos azóis, não apresentaram resistência a voriconazol e se mostraram selvagens ao posaconazol. Dos 45 isolados analisados, 33 foram classificados como não-WT selvagens em relação a anfotericina B, 25 para isavuconazol e 20 para itraconazol, e nenhum não-WT para posaconazol. Os valores de sensibilidade para os MICs 50 foram os seguintes: anfotericina B: 1-2 mcg/mL; voriconazol e posaconazol: 0,5 mcg/mL; para isavuconazol e itraconazol, variando entre 0,5-1 mcg/mL. Quanto ao MIC 90, houve variação entre 2-4 g/mL para anfotericina B, 1 mcg/mL para voriconazol e entre 0,5-1 mcg/mL para posaconazol e isavuconazol, e entre 0,5-2 mcg/mL para itraconazol. Os Aspergillus spp. testados mostraram se não selvagens frente aos azóis e à Anfotericina B, demonstrando a necessidade de sequenciamento do gene Cyp51 para identificar possíveis correlações com mutações no gene Cyp51A e em seu gene promotor.