Avaliação de resultados discrepantes obtidos na execução de PCR em tempo real em amostras de pacientes com suspeita clínica de meningite bacteriana
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Palabras clave

reação em cadeia da polimerase em tempo real
meningite bacteriana
diagnóstico laboratorial
N. meningitidis
S. pneumoniae
H. influenzae

Cómo citar

1.
Salgado MM, Gonçalves MG, Higa FT, Fukasawa LO, Oliveira PL de, Silva CN da, Sacchi C tavares. Avaliação de resultados discrepantes obtidos na execução de PCR em tempo real em amostras de pacientes com suspeita clínica de meningite bacteriana. Rev Inst Adolfo Lutz [Internet]. 22 de febrero de 2012 [citado 3 de julio de 2024];72(2):161-4. Disponible en: https://periodicos.saude.sp.gov.br/RIAL/article/view/32912

Resumen

O princípio básico para obter resultado confiável é a compatibilidade entre as réplicas e sua reprodutibilidade. Na rotina diagnóstica por PCR em tempo real (PCR-TR), em que centenas de amostras são processadas, a obtenção de resultados com Cts tardios ou réplicas que diferem entre si por mais de três unidades, são inevitáveis. Das 3.000 amostras processadas em 2010, em duplicata, na rotina diagnóstica das meningites bacterianas por PCR-TR na pesquisa de N. meningitidis, S. pneumoniae e H. influenzae,
157 (5,2 %), apresentaram inconsistência entre as réplicas (diferença entre Cts maior do que 3) e/ou altos valores de Cts; e os ensaios foram retestados. O presente trabalho investigou estes resultados obtidos, os benefícios destas repetições e as possíveis razões da ocorrência dos resultados discrepantes. Verificouse que, apenas 18 (11 %) das amostras submetidas à repetição, apresentaram resultados positivos. Erros humanos inerentes à pipetagem, como o uso de pipetas não calibradas, a baixa concentração de DNA alvo nas amostras, a degradação da sonda ou mesmo a possível contaminação aleatória são fatores que
contribuem para induzir resultados discrepantes. A realização do ensaio de PCR-TR com amostras em
duplicata e a repetição de ensaios com resultados discordantes é um artifício eficiente para avaliar e definir
estes resultados.

https://doi.org/10.18241/0073-98552013721558
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Citas

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Derechos de autor 2012 Revista del Instituto Adolfo Lutz

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