Investigação e isolamento de Leishmania: criopreservação de amostras de biópsias de lesões cutâneas na Leishmaniose Tegumentar Experimental

Resumo

Foi investigada a viabilidade do isolamento de Leishmania (V.) braziliensis e L. (L.) amazonensis a partir da criopreservação, a -20^oC, -70 ^oC e -196 ^oC, de amostras de biópsias de lesões cutâneas de hamsters (Mesocricetus auratus) experimentalmente infectados. Biópsias de 2mm de diâmetro foram obtidas de lesões de patas de hamsters. Metade das biópsias foi acondicionada em tubos de poliestireno para congelamento, contendo 1,0 ml de solução salina estéril e 0,1 ml de glicerol. As amostras restantes foram, individualmente, maceradas em solução salina estéril e acondicionadas em alíquotas de 1,0 ml em tubos de poliestireno para congelamento, com 0,l ml de glicerol. Foram constituídos três grupos de tubos, que foram mantidos, inicialmente, por uma noite a 4 ^oC, sendo transferidos sucessivamente para -20 ^oC, -70 ^oC  e -196 ^oC, que foram as temperaturas de manutenção, respectivamente, para os grupos 1, 2 e 3, que assim permaneceram por um período de 60 dias. Após este período as amostras foram descongeladas e examinadas em esfregaços, culturas e inoculações desses materiais. Ambas as espécies de Leishmania sobreviveram na condição de manutenção estabelecida para o grupo 1, ou seja -20' ^oC, tanto em biópsia como em homogenizado de macerado de biópsia. L. (L.) amazonensls sobreviveu, também, na condição de manutenção do grupo 3, a -196 ^oC.