Detecção label free de RNA de vírus HIV: genossensor baseado em quantum dots de grafeno e nanopartículas de ouro

Resumo

A infecção por HIV ainda é uma preocupação mundial, apesar dos grandes avanços em tratamentos e diagnósticos. Os métodos convencionais de detecção, como RT-PCR, são muito eficientes, porém são caros, necessitam de mão de obra especializada e utilização de grande volume de reagentes. Os biossensores são dispositivos que preenchem essas lacunas e possuem grande potencial para diagnósticos específicos, seletivos, sensíveis, portáteis e estáveis. Os biossensores eletroquímicos são extensamente explorados no diagnóstico de doenças devido ao seu baixo custo, sensibilidade e rapidez de resposta. Este trabalho apresenta a construção de um genossensor específico para HIV através da modificação de eletrodos screen printed de carbono lab made com quantum dots de grafeno decorados com l-cisteína e nanopartículas de ouro (cys-GQDs/AuNps) e sonda de oligonucleotídeos específica para HIV. A detecção de alvo complementar de RNA foi realizada por voltametria de pulso diferencial monitorando a resposta de corrente da sonda redox aniônica [Fe(CN)6]^3-/4-. A validação foi realizada com quatro amostras de RNA de pessoas vivendo com HIV (HIV+) e duas amostras negativas (HIV-). Todas as amostras foram enriquecidas com plasma saudável (1:1). As amostras positivas se diferenciaram das amostras negativas, ocorrendo uma diminuição do pico de resposta de corrente da sonda aniônica para as amostras positivas. Esse processo ocorre devido à hibridização de sonda e alvo complementar e dificuldade de transferência eletrônica na interface eletrodo-solução, possibilitando a detecção da presença do RNA. Este genossensor apresenta sensibilidade, especificidade e seletividade para detecção precoce do HIV com validação em amostras reais de indivíduos vivendo com o vírus HIV de forma rápida e de baixo custo.