Palavras-chave
fraude
PCR mutiplex
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Resumo
No presente estudo foi verificada a eficiência da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) multiplex para detecção de fraude por adição de leite bovino em queijo de búfala, e para identificar amostras dequeijo fraudadas no comércio de municípios dos estados do Pará e Amapá. Os queijos de búfalacontendo 10 %, 25 %, 50 %, 75 % e 90 % de leite bovino foram produzidos, bem como os queijos exclusivamente de vaca e búfala (controles). Essas amostras foram analisadas por meio de Reação em Cadeia da Polimerase. Posteriormente, 44 amostras de queijos bubalinos foram coletadas na região alvo doestudo e a PCR multiplex foi novamente utilizada, visando à detecção de fraude. Os resultados obtidos demonstraram que os iniciadores utilizados neste trabalho foram capazes de detectar o incremento de todasas percentagens de leite de vaca nos queijos de búfala experimentalmente fraudados, e que 13,6 % das amostras comercialmente disponíveis continham leite bovino. PCR multiplex é uma técnica capaz de detectar adição de valores a partir de 10 % de leite bovino não declarado na rotulagem de queijo de búfala,e este tipo de fraude foi encontrado nas amostras comercializadas nos municípios do Amapá e Pará, Brasil.Referências
1. Brasil. Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento. Decreto n° 30.691, de 29 de março de 1952. Regulamento da Inspeção Industrial e Sanitária dos Produtos de Origem Animal (RIISPOA). Diário Oficial [da] União. Brasília, DF,7 jul. 1956. Seção 1, 10785p.
2. Oliveira RL, Ladeira MM, Barbosa MAAF, Matsushita M, Santos GT, Bagaldo AR. Composição química e perfil de ácidos graxos do leite e muçarela de búfalas alimentadas com diferentes fontes de lipídeos. Arq Bras Med Vet Zootec. 2009; 61 (3): 736-44. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352009000300030
3. Drummond MG, Brasil BSAF, Dalsecco LS, Brasil RSAF, Teixeira LV, Oliveira DAA. A versatile real-time PCR method to quantify bovine contamination in buffalo products. Food Control. 2013; 29(1): 131-7. doi:10.1016/j.foodcont.2012.05.051
4. Mendes CG, Sakatomo SM, Silva JBA, Jácome CGM,Leite AI. Análise físico-químicas e pesquisa de fraude no leite informal comercializado no município de Mossoró, RN. Ci Anim Bras. 2010; 11 (2): 349-56. doi 10.526/cab.v11i2.1146
5. Dias SS, Nogueira LC, Reis RCS, Barbosa CG. Avaliação da Disponibilidade e Rotulagem de Derivados de Leite de Búfala nas Diferentes Estações do ano comercializados na Zona Oeste do Rio de Janeiro. Alim Nutr. 2012; 23(3): 421-6.
6. Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística. Pecuária 2012: Bovinos - efetivo dos rebanhos. [Acesso 2014 jul13]. Disponível em: [http://www.ibge.gov.br/estadosat/].
7. Darwish S F, Allam HA, Amin AS. Evaluation of PCR Assay for Detection of Cow⁾s Milk in Water Buffalo⁾s Milk. World Appl Sci J. 2009; 7(4): 461-7.
8. López-Calleja I, Gonzalez A, Farjado V, Rodríguez MA, Hernández PE, García RM. PCR Detection of Cow’s Milk in Water Buffalo Milk and Mozzarella Cheese. Int Dairy J. 2005; 15(11): 1122-9. doi:10.1016/j.idairyj.2004.12.003
9. Dalmasso E, Fontanellab P, Piattib T, Civeraa S, Rosatic MT, Bottero A. Multiplex PCR assay for the identification of animal species in feedstuffs. Mol Cell Probes. 2004; 18(2): 81-7. doi:10.1016/j.mcp.2003.09.006
10. Mašková E, Paulíčková E. PCR-Based Detection of Cow’s Milk in Goat and Sheep Cheeses Marketed in the Czech Republic. Czech J Food Sci. 2006; 24(3): 127–32.
11. Dias SS, Lobato V, Verruma-Bernardi MR. Metodologias para identificar adulteração em queijos produzidos com leite de diferentes espécies de animais. Rev Inst Adolfo Lutz. 2009; 68(3): 327-33.
12. Bottero MT, Civera T, Nucera D, Rosati S, Sacchi P, Turi RM. A multiplex polymerase chain reaction for the identification of cow’s, gost’s and sheep’s milk in dairy products. Int Dairy J. 2003; 13(4): 277-82. doi:10.1016/S0958-6946(02)00170-X
13. Reale S, Campanella A, Mergioli A, Pilla F. A novel method for species identification in milk and milk-based products. J Dairy Res. 2008; 75(1): 107-12. doi: 10.1017/S0022029907003020
14. Felligini M, Bonizzi I., Curik VC, Parma P, Greppi GF, Enne G. Detection of adulteration in Italian Mozzarella Cheese Using Mitochondrial DNA Templates as Biomarkes. Food Technol Biotechnol. 2005; 43(1): 91-5.
15. Zhang CL, Fowler MR, Scott NW, Lawson G, Slater A. A TaqMan real-time PCR system for the identification and quantification of bovine DNA in meats, milks and cheeses. Food Control. 2007; 18(9): 1149-58. doi:10.1016/j.foodcont.2006.07.018
16. Rea S, Chikuni K, Branciari R, Sangamayya RRS, Ranucci D, Avellini P. Use of duplex polymerase chain reaction (duplex-PCR) technique to identify bovine and water buffalo milk used in making mozzarella Cheese. J Dairy Res. 2001; 68(4): 689-98. doi: 10.1017/S0022029901005106
17. Veloso ACA, Teixeira N, Ferreira IMPLVO, Ferreira MA. Detecção de Adulterações em Produtos Alimentares Contendo Leite e/ou proteínas Lácteas. Quim Nova. 2002; 25 (4): 609-15. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-40422002000400016
18. Teixeira LV, Teixeira CS, Caldeira LGM, Bastianetto E, Oliveira DAA. Extração de DNA e Avaliação da Composição Espécie- específica de Queijos. Arq Bras Med Vet Zootec. 2012; 64(3): 721-6. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352012000300025
19. Boom R, Sol CJ, Salimans MM, Jansen CL, Wertheim-van Dillen PM, Van der Noordaa J. Rapid and simple method for purification of nucleic acids. J Clin Microbiol. 1990; 28(3): 495-503.
20. Figueiredo EL, Júnior JBL, Toro UM, Lima SCG. Queijo do Marajó Tipo Creme: Parâmetros Físico-Químicos e Sensoriais. Rev Inst Latic Cândido Tostes. 2011; 373(66): 26-33.
21. Pará. Secretaria de Estado de Pesca e Aquicultura. Lei Estadual nº 7.565, de 25 de Outubro de 2011. Dispõe sobre normas para licenciamento de estabelecimentos processadores, registro e comercialização de produtos artesanais comestíveis de origem animal e vegetal no Estado do Pará. Diário Oficial [do] Estado do Pará. Belém, Pará, 16 Jul. 2012. Caderno 6 -7, 8p.
22. Sambrook J, Fritcsh EF, Maniatis T. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. 2. ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory; 1989.
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