Mecanismos moleculares associados à resistência aos azólicos em isolados de Candida tropicalis do estado do Paraná

Abstract

C. tropicalis tende a ser mais suscetível aos azólicos quando comparada com outras espécies de Candida spp. Entretanto, o aumento nos índices de resistência da espécie causa preocupação devido à morbi-mortalidade das infecções. Foram investigados os mecanismos moleculares associados à resistência aos azólicos em C. tropicalis isoladas de amostras de urina e hemocultura no estado do Paraná (2016 – 2022). Sete isolados resistentes ao fluconazol e ao voriconazol foram identificados em MALDI-TOF MS, testados quanto à capacidade de produção de biofilme e à sensibilidade aos antifúngicos, utilizando métodos de referência. Ainda, foram realizadas a tipagem de sequência multilocus (MLST), amplificação e sequenciamento do gene ERG11 e quantificação dos níveis de expressão de ERG11, MDR1 e CDR1 – genes codificadores de bombas de efluxo – por RT-qPCR (SYBR Green). O gene ACT1 foi utilizado como normalizador e sete isolados susceptíveis aos azólicos foram incluídos para comparação. Do total, 71,4% (n = 5) dos isolados eram de urina e 28,6% (n = 2) de sangue. Todos eram fortes ou moderados produtores de biofilme. A concentração inibitória mínima (MIC) do fluconazol variou de 8 a > 64 mg/L e do voriconazol de 0,25 a 1 mg/L. Não houve diferença nos níveis de expressão de ERG11, já MDR1 e CDR1, estavam significativamente mais expressos nos isolados sensíveis. Todos os isolados tinham o gene ERG11 mutado, sendo as mutações Y132F e Y257N as mais prevalentes (71,4%), seguidas por Y132F e S154F (14,3%) e Y257H (14,3%). Foram encontrados quatro perfis alélicos diferentes e todos os tipos de sequência diplóide (DSTs) identificados eram novos para o banco de dados PubMLST. O trato urinário pode servir como reservatório para a disseminação de resistência aos azólicos, portanto, compreender os mecanismos envolvidos nesse processo pode contribuir para o manejo clínico dos pacientes acometidos e para a prevenção da disseminação.