Comparação entre o cultivo microbiológico e a PCR na identificação do complexo Mycobacteirum tuberculosis e da espécie Mycobacterium bovis em amostras bovinas

Resumen

Foi avaliado o desempenho das técnicas de cultivo microbiológico e de PCR na análise de amostras de órgãos bovinos com lesões suspeitas de tuberculose. Cinquenta e duas amostras, colhidas em abatedouros, foram analisadas pelo cultivo microbiológico e o DNA extraído foi amplificado por PCR, utilizando-se os primers NZ1 e NZ2, que identificam micobactérias do complexo M. tuberculosis, e o par de primers pncA que diferencia as espécies M. bovis e M. tuberculosis. As 30 amostras de colônias isoladas foram suspensas, e a amplificação do DNA extraído foi feita por PCR, empregando-se os mesmos pares de primers. Embora a concordância entre as técnicas de cultivo microbiológico e de PCR realizado diretamente nas amostras clínicas com os primers NZ1 e NZ2 tenha sido fraca (k=0,175), os dois pares de primers utilizados amplificaram os genes alvos quando aplicados em 100% do DNA extraído das 30 colônias isoladas. Pela PCR com par de primers pncA houve identificação de M. bovis nas colônias isoladas em curto intervalo de tempo, quando comparado aos testes bioquímicos. O uso concomitante de ambas as técnicas reduz o tempo para efetuar a confirmação do agente isolado, fator essencial nos estudos epidemiológicos e nas medidas de controle preventivas.