Palavras-chave
doenças granulomatosas
autoimunidade
proteínas de choque térmico
HSP-60
HSP-65
imunopatologia
Western blot
Como Citar
Resumo
Nestes estudos foram investigados se o Mycobacterium leprae (M. leprae) e o homem compartilham determinantes antigênicos que podem estar localizados nas Proteínas de Choque Térmico (HSPs) e que podem ser responsáveis pela destruição tecidual. Usando-se técnica de coloração única pela imunoperoxidase em cortes feitos com criostato, observaram-se três anticorpos que eram dirigidos contra HSP-60 (anticorpos policlonais SPA-804, SPA-805 e o anticorpo monoclonal SPA-807), que provavelmente reagiam especificamente com macrófagos e células epitelióides em biópsias cutâneas de pacientes com hanseníase. No Western Blot foi observado que todos os anticorpos contra HSP-60 humana e anticorpos monoclonais (MoAbs) contra HSP-65 do M. leprae (F47-10, F67-18, F88-1) reagiam intensamente com as proteínas do M. leprae sonicado com peso molecular de 65 kDa, indicando semelhança de alguns determinantes antigênicos entre HSP-60 humana e HSP-65 do M. leprae. Subseqüentemente, um estudo imunoistoquímico comparativo dos padrões de coloração de anticorpos contra HSP-60 humana e anticorpos contra HSP-65 do M. leprae, usando cortes cutâneos feito em criostato de hanseníase paucibacilar (PB), multibacilar (MB) e outras doenças granulomatosas, revelaram que os MoAbs F47-10 e F67-18 reagiam somente fracamente com os granulomas em hanseníase PB e em outras doenças granulomatosas cutâneas, mas coravam o granuloma da hanseníase MB intensamente. O MoAb F88-1 e os anticorpos policlonais SPA-804, SPA-805 e o MoAb SPA807 coraram os granulomas dos pacientes PB e de outras doenças cutâneas granulomatosas com a mesmaintensidade daquela nos pacientes MB. Utilizando-se uma técnica de dupla coloração, observou-se que os determinantes antigênicos reconhecidos pelo MoAb contra HSP-60 humana (SPA-807) e os MoAbs contra a HSP-65 do M. leprae (F67-18, F47-10, F88-1) estavam, na maioria das vezes, localizados nos macrófagos. Esses achados não contradizem nossa hipótese de que semelhanças entre determinantes antigênicos nas HSPs no M. leprae e no hospedeiro humano podem ser, no mínimo em parte, responsáveis pela indução de uma reação autoimune na hanseníase causando formação de granuloma com subseqüente dano tecidual. Os resultados deste estudo também indicaram que alguns destes determinantes estão provavelmente localizados na HSP-60. Uma explicação similar possivelmente se aplique aos achados em outras doenças granulomatosas, como por exemplo, na sarcoidose provavelmente induzida por micobactéria, e na necrobiose lipoídica relacionada ao diabete, nas quais considera-se que epítopos semelhantes existam entre a HSP-65 bacteriana e a HSP-60 humana e desempenhem um papel importante.
Referências
2 ARONI, K.; KONTOCHRISTOPOULUS, G.; LIOSSI, A.;PANTELEOS, D.; DAVARIS, P. Immunohistochemical study of HSP-70 in two basic leprosy groups. Arch. Dermatol. v. 288, p. 252-254, 1996.
3 BOEHNCKE, W.H.; DAHLKE, A.; ZOLLNER T.M.; STERRY, W. Differential expression of heat shock protein 70 (HSP 70) and heat shock cognate protein (HSC 70) in human epidermis. Arch. Dermatol. v. 287, p. 68-71, 1994.
4 BOOG, C.J.P.; De GRAEFF-MEEDER, E.R.; LUCASSEN M.A.; VAN DER ZEE, R.; VOORHORST-OGINK, M.M.; VAN KOOTEN, J.S.; GEUZE, H.J., VAN EDEN, W. Two monoclonal antibodies generated against human HSP60 show reactivity with synovial membranes of patients with juvenile chronic arthritis. J. Exp. Med., v.175, p. 1805-1810, 1992.
5 BUCHANAN, T.M.; NOMAGUCHI, H.; ANDERSON, D.C.; YOUNG, R.A.; GILLIS, T.P.; BRITTON, W.J.; IVANYI, J.; KOLK, A.H.J.; CLOSS, O.; BLOOM, B.R.; MEHRA, V. Characterization of antibody-reactive epitopes on the 65 kilodalton protein of Mycobacterium leprae. Infect. Immun., v.55, p. 1000-1003, 1987.
6 CATTORETTI, G.; BERTI, E.; SCHIRO, R.; D’AMATO, L.; VALEGGIO, C.; RILKE, F. Improved avidin-biotin-peroxidase complex (ABC) staining. Histol. J., v. 20, p. 75-80, 1988.
7 CIOCCA, D.R.; ADAMS, D.J.; BJERCKE, R.J.; EDWARDS, D.P.; MCGUIRE, W.L. Immunohistochemical detection of an estrogen-egulated protein by monoclonal antibodies. Cancer Res., v. 42, p. 4256-4258, 1982.
8 COHEN, I.R.; YOUNG, D. Autoimmunity, microbial immunity and the immunological homunculus. Immunol. Today, v. 12, p. 105-110, 1991.
9 COLSTON, M.J.; LAMB, F.I. Molecular Biology of the Mycobacteria. Lepr. Rev., v. 60, p. 89-93, 1989.
10 DALMAN, F.C.; BRESNICK, E.H.; PATEL, P.D.; PERDEW, G.H., WATSON, J.; PRATT, W.B. Direct evidence that the glucocorticoid receptor binds to HSP90 at or near the termination of receptor translation in vitro. J. Biol. Chem., v. 264, p. 19815-19821, 1989.
11 DAMIAN, R.T. Molecular mimicry: Antigen sharing by parasite and host and its consequences. The American Naturalist, v.98, p. 129-149, 1964.
12 DAS, P.K.; TULP, A. Use of unit gravity sedimentation chamber for the purification of M. leprae. Ann. Microbiol. (Paris). v.133B, p. 389-400, 1982.
13 DUDANI, A.K.; GUPTA, R.S. Immunological characterization of a human homolog of the 65 - kilodalton mycobacterial antigen. Infect. Immun., v.57, p.2786-2793, 1989.
14 EDWARDS, M.J.; MARKS, R.; DYKES, P.J.; MERRETT, V.R.; MORGAN, H.E.; O’DONOVAN, M.R. Heat shock proteins in cultured human keratinocytes and fibroblasts. J. Invest. Dermatol., v.96, p. 392-396, 1991.
15 GARSIA, R.J.; HELLQVIST, L.; BOOTH, R.J.; RADFORD, A.J.; BRITTON, W.J.; ASTBURY, L.; TRENT, R.J.; BASTEN, A. Homology of the 70-kilodalton antigens from Mycobacterium leprae and Mycobacterium bovis with the Mycobacterium tuberculosis 71-kilodalton antigen and with the conserved heat shock protein 70 of eucaryotes. Infect. Immun., v.57, p.204-212, 1989.
16 HAREGEWOIN, A.; SINGH, B.; GUPTA, R.S.; FINBERG, R.W. A mycobacterial heat shock protein-responsive gamma delta T-cell clone also responds to the homologous human heat shock protein: a possible link between infection and autoimmunity. J. Infect. Diseas., v.163, p. 156-160, 1991.
17 HORVATH, L.; CERVENAK, L.; ORLOSZLAN, M.; PROHASZKA, Z.; URAY, K.; HUDESZ, F.; BARANYI, E.; MADACSY, L.; SINGH, M.; ROMICS, L.; FUST, G.; PANCEL, P. Antibodies against different epitopes of heat shock protein 60 in children with type I diabetes mellitus. Immunol. Lett. v.80, p. 155-162, 2002.
18 KAUFMANN, S.H.E. Heat shock proteins and the immune response. Immunol. Today., v. 11, p. 129-136, 1990.
19 KHANOLKAR YOUNG, S.; YOUNG, D.B.; COLSTON, M.J.; LOCKWOOD, D.N. Nerve and skin damage is associated with increased intralesional heat shock protein. Clin. Exp. Immunol., v. 96, p. 208-213, 1994.
20 KOLK, A.H.J.; HO, M.L.; KLATSER, P.R. Production and characterization of monoclonal antibodies to M. tuberculosis, M.bovis BCG and M. leprae. Clin. Exp. Immunol., v. 58, p. 511-522, 1984.
21 LAEMMLI, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, v. 227, p. 680-685, 1970.
22 MAYTIN, E.V. Heat Shock Proteins and Molecular Chaperones: Implications for Adaptive Responses in the Skin. J.Invest. Dermatol., v. 104, p. 448-455, 1995.
23 MEHRA, V.; SWEETSER, D.S.; YOUNG, R.A. Efficient mapping of protein antigenic determinants. Proc. Natl. Acad. Sc., v. 83, p. 7013-7017, 1986.
24 MILLER, S.G.; HUETTEL, M.D. Mitochondrial biogenesis during spermatogenesis in Heliothis virescens, H. subflexa and their malesterile back-cross hybrids. Archs. Insect. Biochem., v. 3, p. 363-380, 1986.
25 MODLIN, R.L.; PIRMEZ, C.; HOFMAN, F.M.; TORIGIAN, V.; UYEMURA, K.; REA, T.H.; BLOOM, B.R.; BRENNER, M.B. Lymphocytes bearing antigen specific gamma delta T-cell receptors accumulate in human infectious disease lesions. Nature., v. 339, p. 544-548, 1989.
26 NAAFS, B.; KOLK, A.H.J., CHIEN; A., LIEN, R.A.M.; FABER, W.R.; VAN DIJK, G.; KUIJPER, S.; STOLZ, E.; VAN JOOST, T.H. Anti Mycobacterium leprae monoclonal antibodies crossreact with human skin: an alternative explanation for the immune responses in leprosy. J. Invest. Dermatol., v. 94, p. 685-688, 1990.
27 PERSCHINSKA, H.; MAYO, M. ; MILLONIG, G.; MAYERL, C.,; VAN DER ZEE, R.; MORRISON, S.G., MORRISON, R.P.; XU, Q.; WICK, G. Cross-reactive B-cell epitopes of microbial and human heat shock protein 60/65 in atherosclerosis. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., v. 23, p. 1060-1065, 2003.
28 POLLA, B.S. Heat Shock proteins in host-parasite interactions. Immunol. Today, v. 12, p. 38-41, 1991.
29 POLLA, B.S. The heat shock response in human phagocytes. Immunol. Lett. v.30, p.159-164, 1991.
30 PULFORD, K.A.F.; RIGNEY, E.M.; MICKLEM, K.J.; JONES, M.; STROSS, W.P.; GATTER, K.C.; MASON, D.Y. KPI: A new monoclonal antibody that detects a monocyte/macrophage associated antigen in routinely processed tissue sections. J. Clin. Pathol., v. 42, p. 414-421, 1989.
31 RAMBUKKANA, A.; DAS, P.K.; KRIEG, S.; YONG, S.; LE POOLE, I.C;, BOS, J.D. Mycobacterial 65,000 MW heat shock protein shares a carboxy-terminal epitope with human epidermal cytokeratine 1/2. Immunology, v. 77, p. 267-276, 1992.
32 ROOK, G.H.; STANFORD, J.L. Slow bacterial infections or autoimmunity. Immunol. Today., v. 13, p. 160-164, 1992.
33 STANFORD, J.L. The history and future of vaccination and immunotherapy in leprosy. Trop. Geogr. Med., v. 46, p. 93-107, 1994.
30 Hansenologia Internationalis
34 STATON, J.M.; DENCH, J.E.; CURRIE, B.; FITZPATRICK, D.R.; HIMBECK, R.P.; ALLEN, R.; BRUCE, J.; ROBINSON, B.W.S.; BIELEFELDT-OHMANN, H. Expression and immune recognition of stress proteins in sarcoidosis and other chronic interstitial lung diseases. Immunol. Cell. Biol., v. 73, p. 23-32, 1995.
35 THOLE, J.R.; KEULEN, W.J.; KOLK, A.H.J.; GROOTHUIS, D.G.; BERWALD, L.G.; TIESJEMA, R.H.; VAN EMBDEN, J.D.A. Characterization, sequence determination and immunogenicity of a 64-kilodalton protein of Mycobacterium bovis BCG expressed in Escherichia coli K-12. Infect. Immun., v. 55, p. 1466-1475, 1987.
36 THOLE, J.R.; VAN SCHOOTEN, W.C.A.; KEULEN, W.J.; HERMANS, P.W.M.; JANSON, A.A.M.; DE VRIES, R.R.P.; KOLK, A.H.J.; VAN EMBDEN, J.D.A. Use of recombinant antigens expressed in Escherichia coli K-12 to map B-cell and T-cell epitopes on the immunodominant 65-kilodalton protein of Mycobacterium bovis BCG. Infect. Immun., v. 56, p. 1633-1640, 1988.
37 TOWBIN, H.; STAEHELIN, T.; GORDON, J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Sci., v. 76, p. 4350-4354, 1979.
38 TRAUTINGER, F.; TRAUTINGER, I.; KINDAS-MUGGE, I.; METZE, D. LUGER, T.A. Human Keratinocytes in vivo and in vitro constitutively express the 72-kD heat shock protein. J. Invest. Dermatol., v. 101, p. 334-338, 1993.
39 VAN DEN AKKER, T.H.; NAAFS, B.; KOLK, A.H.J.’; DE GLOPPER-VAN DER VEER, E.; CHIN, A LIEN; R.A.M.; VANJOOST, T.H. Similarity between mycobacterial and human epidermal antigens. Br. J. Dermatol., v. 127 p. 352- 358, 1992.
40 WEBB, R.; REDDY, K.J.; SHERMAN, L.A. Regulation and sequence of the Synechococcus sp. strain PCC 7942 groESL operon, encoding a cyanobacterial chaperonin. J. Bacteriol., v. 172, p. 5079-5088, 1990.
41 YOUNG, D.B.; IVANYI, J.; COX, J.H.; LAMB, J.R. The 65 kDa antigen of mycobacteria- A common bacterial protein? Immunol. Today., v. 8, p. 215-219, 1987.
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